http://hdl.handle.net/10174/254 2026-08-02T10:40:42Z http://hdl.handle.net/10174/42252 Title: Análise de expressão relativa em resposta ao silenciamento de um fator de transcrição no nemátode fitoparasita, Bursaphelenchus xylophilus. Authors: Susano, Gustavo Abstract: O nemátode da madeira do pinheiro (NMP) é um fitoparasita migratório originário da América do Norte onde não causa danos significativos, porém, é uma espécie invasora que infeta coníferas (em Portugal, pinheiro-bravo), causando a doença da murchidão do pinheiro. O NMP é um organismo de quarentena em muitos países, tendo sido detetado pela primeira vez na Europa em 1999, na Península de Setúbal e tem um impacto ne-gativo nos ecossistemas florestais e na economia. Em estudos anteriores, com recurso a sequenciação de RNA (RNAseq), foram identificados os genes altamente expressos quando o nemátode infecta a planta comparativamente ao controlo. Um fator de trans-crição da família dos zinc finger foi considerado importante durante a interação com o hospedeiro e a sua expressão foi silenciada. Neste trabalho pretende-se validar a ex-pressão relativa de um conjunto de genes que, preditivamente, têm um decréscimo da expressão e compreender as vias metabólicas a que pertencem. Através da técnica de RT-qPCR (PCR em tempo real) foi possível validar a expressão de dois genes e verificar que têm uma diminuição da expressão quando o fator de transcrição foi silenciado. 2026-02-12T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10174/41426 Title: NO MONTADO - Estudo da interação macrofungos-nemátodes Authors: Luís, Miguel Abstract: Os solos do montado albergam comunidades diversificadas de organismos com funções ecológicas relevantes. Entre eles, macrofungos e nemátodes coexistem e interagem de forma direta ou indireta, com potenciais implicações no funcionamento do ecossistema. Este estudo teve como objetivo caracterizar a nematofauna associada a corpos frutíferos de macrofungos recolhidos na Herdade da Mitra. Foram colhidos 12 espécimes pertencentes a diferentes grupos tróficos (micorrízicos e sapróbios). Os nemátodes foram extraídos pelo método modificado de Baermann, observados ao microscópio e classificados em grupos tróficos. A identificação dos nemátodes foi realizada através da amplificação da região D2-D3 do gene 28S rRNA e sequenciação. As sequências obtidas foram comparadas com dados do GenBank e utilizadas para a construção de uma árvore filogenética. Verificou-se a presença de nemátodes pertencentes a diferentes grupos, alguns com possível especificidade fúngica. Os resultados sugerem que diferentes espécies de macrofungos poderão ser habitat de comunidades distintas de nemátodes. 2025-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10174/41424 Title: Isolamento e caracterização de bactérias endofíticas de trufas. Authors: Baptista, Eva Abstract: As trufas s. l. (p. ex. Terfezia spp., Tuber spp.) são fungos de elevado valor gastronómico, ecológico e económico, conhecidos pelo seu aroma único e pela capacidade de formar associações simbióticas com raízes de plantas hospedeiras. Contudo, o seu desenvolvimento e qualidade dependem também de interações com comunidades bacterianas endofíticas. Essas bactérias, presentes nos tecidos internos das trufas, desempenham um papel crucial em processos como maturação do corpo de frutificação, produção de compostos voláteis responsáveis pelo aroma característico e proteção contra patógenos. Embora estas bactérias desempenhem funções potencialmente importantes na biologia das trufas, a informação atual sobre a sua diversidade e papel funcional ainda é limitado. 2025-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10174/40634 Title: Validação, por PCR quantitativo, da expressão aumentada de genes no nemátode da madeira do pinheiro (NMP) em resposta ao silenciamento de proteínas zinc finger. Authors: Rodrigues, Eduarda Abstract: As proteínas zinc finger estão entre as proteínas mais abundantes nos genomas eucarióticos. Muitas destas proteínas são fatores de transcrição (FT) que reconhecem e ligam-se a sequências específicas do DNA, exercendo uma função da regulação da expressão genética. Estudos anteriores de RNAseq revelaram uma expressão elevada destes FT durante a infeção da planta com o nemátode fitoparasita Bursaphelenchus xylophilus (causador da doença da murchidão do pinheiro). A expressão destes FT foi silenciada no nemátode e pretende-se agora com esta proposta de estágio validar a expressão de genes que se prevê diminuída como consequência do silenciamento dos FT. Pretende-se igualmente identificar as vias metabólicas nas quais estes genes participam. As técnicas laboratoriais a realizar incluem: isolamento de DNA, PCR convencional, eletroforese em gel de agarose, síntese de cDNA, PCR quantitativo (real time PCR). A análise da expressão relativa por RT-qPCR demonstrou uma redução significativa na expressão dos genes BXY262000 e BXY47000, com diminuições de aproximadamente 35 e 14 vezes, respetivamente, após o silenciamento do fator de transcrição. Estes resultados indicam que ambos os genes podem ser regulados positivamente pelo zinc finger C2H2. 2025-06-30T23:00:00Z